粗純的作用是分離差異較大的物質，如固液分離、胞內或胞外物質分離，減少下游純化工藝的負擔。質粒DNA粗純工藝包括離心、堿裂解和澄清過濾等。一般通過離心或過濾的方式實現固液分離，收集菌體；使用堿裂解法釋放質粒DNA，隨后過濾去除懸浮物質。由于小試與生產規模不同，耀海研發實驗室和車間匹配的離心設備也有所差異。然而離心參數的轉換尤其重要，很大程度上影響產品的質量和收率。

因此小試發酵工藝放大至生產規模時，耀海團隊會判斷設備差異對工藝過程及產物的影響。耀海生物建議在小試與GMP生產的轉移過程中，增加中試放大的環節，以調整工藝參數使其高度契合生產規模。

耀海生物具有超十年微生物體系質粒DNA和重組蛋白生產及服務經驗，針對不同性能/品牌的離心設備積累了豐富的工藝放大經驗。我們可識別并控制關鍵參數，成功實現粗純工藝的放大生產，有效去除雜質的同時保證質粒DNA的收率。

服務詳情

粗純工藝放大前后的差異

粗純工藝放大經驗分享

離心和過濾的目的是實現固液分離，應用場景包括菌體收集、固形物去除等，離心設備關鍵參數包括轉速、進料速度和排渣時間，過濾的關鍵參數是濾膜孔徑、流速和濾器壓力。離心或過濾操作不達標會導致固液分離效果不佳，可能會降低產物收率、增加下游純化壓力，影響產品質量。

耀海生物基于豐富的產物粗純服務經驗，總結了離心和澄清過濾工藝轉移過程中的常見問題和解決方法：