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納米抗體

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納米抗體

納米抗體(Nanobody,Nb), 即重鏈單域抗體VHH (variable domain of heavy chain of heavy-chain antibody),是由比利時科學家于1993年在自然雜志中報道,是駱駝科動物(駱駝,大羊駝,羊駝及其近親物種)缺失輕鏈的天然重鏈抗體的可變區(qū)(VHH)組成的單域抗體,該抗體只包含一個重鏈可變區(qū)(VHH)和兩個常規(guī)的CH2與CH3區(qū)。 VHH晶體為直徑2.5nm、長4nm的圓柱體,分子量只有15 KDa,因此也被稱作納米抗體(Nanobody, Nb)。

圖片來源:International Journal of Nanomedicine 2016:11 3287–3303

納米抗體特點

得益于納米抗體微小的結(jié)構(gòu)、完整的抗原識別能力以及噬菌體篩選技術(shù),納米抗體表現(xiàn)出高親合力、高特異性、強穿透性和易于基因改造和表達等特點,并且由于可以獲得抗體完整序列,納米抗體可以通過體外重組表達高質(zhì)量穩(wěn)定生產(chǎn),有效避免傳統(tǒng)抗體的批次間差異問題。納米抗體的物理和化學穩(wěn)定性,可為診斷和治療提供新的研究工具,在抗體藥物研發(fā)、醫(yī)學基礎(chǔ)研究以及疾病診斷、癌癥和感染性疾病治療等領(lǐng)域展現(xiàn)出了廣闊的應用前景。

  • 與靶點結(jié)合特異性更強

  • 組織穿透力更強

  • 開發(fā)周期短,穩(wěn)定性更高

  • 制備簡單,適合工業(yè)化大規(guī)模生產(chǎn)

  • 可在微生物中高效大量表達

  • 更容易人源化

納米抗體研發(fā)技術(shù)加速服務平臺

耀海生物擁有豐富的納米抗體研發(fā)及生產(chǎn)經(jīng)驗,以強大的技術(shù)平臺、先進的生產(chǎn)設(shè)備以及在納米抗體全生態(tài)表達系統(tǒng)的開創(chuàng)性技術(shù),致力于為客戶提供從菌株構(gòu)建、多功能納米抗體表達與純化,及規(guī)模化生產(chǎn)的一站式納米抗體研發(fā)生產(chǎn)服務,滿足客戶不同實驗或項目需求。

  • 全生態(tài)重組表達系統(tǒng)

    E.coli 原核表達系統(tǒng)
    酵母真核表達系統(tǒng)(畢赤酵母)
    哺乳動物細胞表達系統(tǒng)

  • 多樣化納米抗體類型

    單域納米抗體、二價納米抗體、多價納米抗體

  • 成熟完善純化平臺

    齊全純化平臺,組合式純化方式,高效靈活

  • μg至kg

    納米抗體較高表達量10g/L
    服務規(guī)模7-2000L

目前,耀海生物建立了全生態(tài)的納米抗體表達體系,現(xiàn)有的表達系統(tǒng)包括:E.coli 原核表達系統(tǒng)、酵母表達系統(tǒng)(畢赤酵母)、哺乳動物細胞表達系統(tǒng)(科研級樣品制備),熟練運用多種表達宿主菌,根據(jù)客戶的實際需求,為客戶提供適合且高質(zhì)量的表達體系。

20+品質(zhì)開發(fā)經(jīng)驗積累
不同大腸桿菌宿主靈活選擇
不同表達載體高效選擇
10+品種開發(fā)經(jīng)驗儲備
不同畢赤酵母宿主靈活選擇
PAOX1甲醇誘導表達系統(tǒng)
PGAP組成型表達系統(tǒng)
5+品種納米抗體開發(fā)經(jīng)驗
瞬轉(zhuǎn)表達納米抗體
穩(wěn)轉(zhuǎn)株表達納米抗體
E.coli 原核表達系統(tǒng)
酵母表達系統(tǒng)(畢赤酵母)
哺乳動物細胞表達系統(tǒng)
E.coli 原核表達系統(tǒng)

大腸桿菌表達系統(tǒng)是基因表達技術(shù)中發(fā)展早、應用廣且經(jīng)濟實惠的經(jīng)典表達系統(tǒng)。大腸桿菌具有遺傳背景清楚、細胞增殖快、表達量高、穩(wěn)定性好和抗污染能力強等特點。

納米抗體的分子質(zhì)量小、結(jié)構(gòu)簡單,能被單個基因編碼,利用基因工程能在大腸桿菌等原核微生物中大量表達。

耀海生物可以利用大腸桿菌在胞質(zhì)或者通過信號肽周質(zhì)空間表達納米抗體,成功表達的納米抗體種類超20種。

酵母表達系統(tǒng)(畢赤酵母)

酵母表達系統(tǒng),是工業(yè)生產(chǎn)中應用較為廣泛的系統(tǒng),其遺傳背景清楚安全,兼具原核和真核表達系統(tǒng)的優(yōu)點:增殖快、可在廉價培養(yǎng)基中進行高密度發(fā)酵、能進行復雜的翻譯后修飾、且分泌表達能力強大,有效降低下游純化成本。納米抗體的分子質(zhì)量小、結(jié)構(gòu)簡單,能被單個基因編碼,利用基因工程能在酵母菌等微生物中大量表達。

耀海生物可提供納米抗體高表達菌株的篩選與發(fā)酵工藝開發(fā)服務,采用高密度發(fā)酵,利用畢赤酵母PAOX1誘導表達納米或PGAP組成型表達10余種不同納米抗體,表達量可達到10 g/L以上。

哺乳動物細胞表達系統(tǒng)

哺乳動物細胞表達系統(tǒng)能夠指導蛋白質(zhì)的正確折疊,提供復雜的N型糖基化和準確的O型糖基化等多種翻譯后加工功能,因而表達產(chǎn)物在分子結(jié)構(gòu)、理化特性和生物學功能方面,接近于天然的高等生物蛋白質(zhì)分子。

耀海生物可利用哺乳動物細胞CHO系列細胞,通過瞬轉(zhuǎn)方法或構(gòu)建穩(wěn)轉(zhuǎn)株來表達多種不同納米抗體。利用CHO系列細胞瞬轉(zhuǎn)表達納米抗體,表達量可達20mg/L;利用CHO系列細胞穩(wěn)轉(zhuǎn)株表達納米抗體,表達量可達15mg/L。

納米抗體表達服務內(nèi)容

由客戶提供納米抗體基因序列或氨基酸序列,自主選擇表達宿主細胞,耀海生物提供從基因合成至納米抗體表達與純化、及規(guī)模化生產(chǎn)的一站式納米抗體研發(fā)生產(chǎn)服務。

步驟 服務內(nèi)容 周期 交付
納米抗體表達工程菌構(gòu)建(可以選擇畢赤酵母,大腸桿菌或者哺乳動物細胞)


1.大腸桿菌表達系統(tǒng)(胞質(zhì)或周質(zhì)空間表達)


2.畢赤酵母表達系統(tǒng)(可以選用甲醇誘導型表達系統(tǒng)PAOX1或者組成型表達系統(tǒng)PGAP)


3.哺乳動物表達系統(tǒng)(通過瞬轉(zhuǎn)或者穩(wěn)轉(zhuǎn)來表達納米抗體)


大腸桿菌1-2周(不包括基因合成周期)
畢赤酵母2-3周
哺乳動物瞬轉(zhuǎn)1-2周 穩(wěn)轉(zhuǎn)株2個月左右
純化得到的納米抗體,純化抗體檢測報告SDS-PAGE,SEC-HPLC(選做)、RP-HPLC(選做)和CE-SDS(選做)純度分析方法
小量表達純化(標簽) 對構(gòu)建的工程菌納米抗體表達,對1L表達體積的蛋白進行純化(推薦加標簽)。 2-3周
大規(guī)模表達純化 大規(guī)模發(fā)酵納米抗體樣品,同時對于發(fā)酵的納米抗體進行表達純化。 5-8周
服務優(yōu)勢
  • 經(jīng)驗豐富

    成熟的納米抗體表達純化平臺,以豐富的技術(shù)及項目經(jīng)驗,提供一站式服務。

  • 專家團隊

    強大的技術(shù)服務團隊,具備豐富生物學技術(shù)背景,以博士為主導的表達純化平臺,提供一對一專項技術(shù)服務。

  • 全域表達平臺

    具備穩(wěn)定的原核細胞E.Coli 、真核畢赤酵母及哺乳動物細胞CHO等納米抗體表達平臺,客戶可根據(jù)需求靈活選擇表達平臺,減少試錯成本。

  • 完備質(zhì)量體系

    具備深厚納米抗體質(zhì)量評價體系經(jīng)驗,建立SDS-PAGE、SEC-HPLC、RP-HPLC及基于毛細管電泳的CE-SDS等多種純度分析方法。

  • 高效捕獲純化體系

    豐富納米抗體純化經(jīng)驗,積累親和層析、離子層析、疏水層析等多種純化方式,可對不同純化方案靈活組合,實現(xiàn)純度≥98%。

  • 大規(guī)模生產(chǎn)

    可提供7-2000L的服務規(guī)模。

服務案例
利用微表達生產(chǎn)不同納米抗體
服務案例
利用微生物表達不同納米抗體
利用畢赤酵母表達一價納米抗體
利用畢赤酵母表達二價納米抗體
利用畢赤酵母表達三價納米抗體
納米抗體純化體系
服務案例
納米抗體純化體系
通過對protein A親核層析,對納米抗體進行純化。
根據(jù)PAGE膠檢測結(jié)果,純化得到納米抗體純度為90%以上。
通過對離子層析,對納米進行純化。
根據(jù)PAGE膠檢測結(jié)果,純化得到納米抗體純度為95%以上。
納米抗體質(zhì)量評價體系
服務案例
利用微生物生產(chǎn)不同納米抗體
通過SDS-PAGE、SEC-HPLC對純化的納米抗體進行分析,納米抗體純度可以達到95%以上。
通過SEC-HPLC對純化的納米抗體進行分析,納米抗體純度可以達到99%以上。
通過CE-SDS對純化的納米抗體進行分析,納米抗體純度可以達到98%以上。
定制服務-在線詢價
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